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    大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒

    大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒

    簡要描述:產(chǎn)品名稱:大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒

    目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿、組 織勻漿及相關(guān)液體樣本中腫瘤壞死因子β(TNF-β)的含量。

    更新時間:2021-01-28

    廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

    瀏覽次數(shù):658

    詳情介紹
    品牌其他品牌貨號BFNE85519
    規(guī)格48T/96T供貨周期現(xiàn)貨
    主要用途僅用于科研應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

    產(chǎn)品名稱:大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒

     

     

    操作步驟
    1.標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL;。
    2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
    3.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 100μl,空白孔除外。
    4.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘。
    5.配液:將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。
    6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
    7.顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    8.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
    9.測定:以空白孔調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
     

    樣本處理及要求:
    1.血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收 集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
    2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
    3.尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
    4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
    5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
    6.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上 進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
    7.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
     
    大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒


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