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    XL1-Blue MRF` Kan化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

    XL1-Blue MRF` Kan化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

    簡要描述:XL1-Blue MRF` Kan化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
    XL1-Blue MRF’Kan菌株來源于XL1-Blue株系,是限制酶系統(tǒng)缺失型[?(mcrA)183, ?(mcrCB-hsdSMR -mrr)173],,且具有卡那霉素抗性 (KanR),可轉(zhuǎn)化具有氯霉素或四環(huán)素抗性的質(zhì)粒。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。

    更新時間:2022-01-18

    廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

    瀏覽次數(shù):716

    詳情介紹
    品牌其他品牌貨號BFNC86009
    規(guī)格10x100ul/50x100ul供貨周期現(xiàn)貨
    主要用途僅用于科研應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

    XL1-Blue MRF` Kan化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞



    產(chǎn)品規(guī)格CAT#: BFNC86009-01(10×100ul)/BFNC86009-02(50×100ul)

    XL1-Blue MRF` Kan:                                     100μl/支

    pUC19 (control vector,10pg/μl):                       10μl

    保存條件(保質(zhì)期):                           -80℃(6個月)


    基因型

    ?(mcrA)183 ?(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac [F′proAB lacIqZ?M15 Tn5 (KanR)]





    產(chǎn)品說明

    XL1-Blue MRF’Kan菌株來源于XL1-Blue株系,是限制酶系統(tǒng)缺失型[?(mcrA)183, ?(mcrCB-hsdSMR -mrr)173],,且具有卡那霉素抗性 (KanR),可轉(zhuǎn)化具有氯霉素或四環(huán)素抗性的質(zhì)粒。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。hsdR17突變導(dǎo)致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。 lacIqZΔM15 的存在使XL1-Blue MRF’Kan菌株可用于藍(lán)、白斑篩選。

    青旗生物生產(chǎn)的XL1-Blue MRF’Kan感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。



    XL1-Blue MRF` Kan化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞


    操作方法


    1. XL1-Blue MRF’Kan感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA并用手bo打EP管底充分混勻,冰中靜置25分鐘。


    2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

    3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

    4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或

    LB培養(yǎng)基上。

    5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。



    注意事項(xiàng)


    1. 感受態(tài)細(xì)胞適宜在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。

    2. XL1-Blue MRF’Kan感受態(tài)細(xì)胞具有卡那霉素抗性,不可轉(zhuǎn)化具有卡那霉素抗性的質(zhì)粒。

    3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。





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