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| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN60800695 |
|---|---|---|---|
| 規格 | T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
細胞名稱 | 人肝癌細胞BEL-7402 |
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貨物編碼 | BFN60800695 | ||
產品規格 | T25培養瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 2類 | ||
培養體系 | DMEM高糖培養基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） | ||
培養溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人肝癌細胞BEL-7402細胞株是1974年從臨床肝癌手術標本中建立的。細胞群體倍增時間為20小時。移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結節。細胞形態呈上皮樣細胞。在電子顯微鏡下亦顯示上皮細胞所具有的橋粒和張力原纖維，與臨床肝癌細胞相似。分瓶培養第四天時，其有絲分裂指數約為7%。BEL-7402細胞的染色體數為不足三倍體，有一個異常的近端著絲點染色體。間接免疫熒光法測BEL-7402細胞內的AFP為陽性反應。LDH同工酶譜顯示與成年人肝細胞不同，而與人胚肝及臨床肝癌相近。 | ||
注釋 | Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=28807831). Originally thought to originate from a 53 year old male patient hepatocellular carcinoma. Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00549. Doubling time: 20 hours (PubMed=6154311); 31.2 +- 1.1 hours (PubMed=23167424). Transformant: NCBI_TaxID; 333761; Human papillomavirus type 18 (HPV18). Omics: Deep quantitative proteome analysis. Omics: SNP array analysis. Omics: Transcriptome analysis. | ||
STR信息 | Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:13.3；D16S539:9,10；D18S51:16；D19S433:13；D21S11:27,28；D2S1338:17；D3S1358:15,18；D5S818:12；D7S820:12；D8S1179:12；FGA:18,21；TH01:7；TPOX:12；vWA:16,18 | ||
參考文獻 | PubMed=6154311; DOI=10.1360/ya1980-23-2-236 Chen R.-M., Zhu D.-H., Ye X.-Z., Shen D.-W., Lu R.-H. Establishment of three human liver carcinoma cell lines and some of their biological characteristics in vitro. Sci. Sin. 23:236-247(1980)
PubMed=6275024; DOI=10.1099/0022-1317-57-1-95 Koshy R., Maupas P., Muller R., Hofschneider P.H. Detection of hepatitis B virus-specific DNA in the genomes of human hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis tissues. J. Gen. Virol. 57:95-102(1981)
DOI=10.1007/978-4-431-68349-0_4 Alexander J.J. Human hepatoma cell lines. (In) Neoplasms of the liver; Okuda K., Ishak K.G. (eds.); pp.47-56; Springer; Tokyo (1987)
PubMed=1849045 Fuhrer J.P., Xie H., Murphy M.J. Jr., Ye J.N., Yao Z. Characterization of a membrane-associated glycoprotein (gp 43) on human hepatocellular carcinoma by a monoclonal antibody. Cancer Res. 51:2158-2163(1991)
PubMed=14571772 Liu L.-X., Jiang H.-C., Liu Z.-H., Zhu A.-L., Zhou J., Zhang W.-H., Wang X.-Q., Wu M. Gene expression profiles of hepatoma cell line BEL-7402. Hepato-Gastroenterol. 50:1496-1501(2003)
PubMed=23167424; DOI=10.7314/APJCP.2012.13.9.4807 Gu W., Fang F.-F., Li B., Cheng B.-B., Ling C.-Q. Characterization and resistance mechanisms of a 5-fluorouracil-resistant hepatocellular carcinoma cell line. Asian Pac. J. Cancer Prev. 13:4807-4814(2012)
PubMed=23505090; DOI=10.1002/hep.26402 Wang K., Lim H.Y., Shi S., Lee J., Deng S., Xie T., Zhu Z., Wang Y., Pocalyko D., Yang W.J., Rejto P.A., Mao M., Park C.-K., Xu J. Genomic landscape of copy number aberrations enables the identification of oncogenic drivers in hepatocellular carcinoma. Hepatology 58:706-717(2013)
PubMed=28807831; DOI=10.1016/j.jhep.2017.08.002 Rebouissou S., Zucman-Rossi J., Moreau R., Qiu Z.-X., Hui L.-J. Note of caution: contaminations of hepatocellular cell lines. J. Hepatol. 67:896-897(2017) | ||
驗收細胞注意事項
1、收到人肝癌細胞BEL-7402細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。
2、收到人肝癌細胞BEL-7402細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人肝癌細胞BEL-7402細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養。若細胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到人肝癌細胞BEL-7402細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML 培養基繼續培養：超過 80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。
6、24 小時后，人肝癌細胞BEL-7402細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2 培養。
特別提醒： 原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。
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