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| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN608006122 |
|---|---|---|---|
| 規格 | T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
細胞名稱 | 人肝永生化細胞THLE-3 |
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貨物編碼 | BFN608006122 | ||
產品規格 | T25培養瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 | ||
培養體系 | DMEM高糖培養基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） | ||
培養溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人肝永生化細胞THLE-3細胞系是正常肝細胞用SV40大T抗原轉染得到。將含有SV40T抗原的BglI-HpaI片段的逆轉錄病毒載體導入兼嗜性包裝細胞株PA317中生產病毒。THLE-2andTHLE-3表達正常成人肝上皮細胞特征性的表型。當注射到無胸腺裸鼠中時，它們不成瘤，具有接近二倍體的核型，不表達甲胎蛋白。人肝永生化細胞THLE-3細胞由青旗（上海）生物技術發展有限公司于2018年引種自ATCC(CRL-11233)。 | ||
注釋 | Transformant: NCBI_TaxID; 1891767; Simian virus 40 (SV40). | ||
STR信息 | Amelogenin X CSF1PO 11,12 D5S818 13 D7S820 8,10 D13S317 13 D16S539 11,12 TH01 8,9.3 TPOX 6,9 vWA 17,18 | ||
參考文獻 | DOI=10.1007/978-1-4612-0411-4_31 Lechner J.F., Smoot D.T., Pfeifer A.M.A., Cole K.H., Weston A., Groopman J.D., Shields P.G., Tokiwa T., Harris C.C. A non-tumorigenic human liver epithelial cell culture model for chemical and biological carcinogenesis investigations. (In) Neoplastic transformation in human cell system. Mechanism of carcinogenesis; Rhim J.S., Dritschilo A. (eds.); pp.307-321; Humana Press; New York (1990)
PubMed=7685115; DOI=10.1073/pnas.90.11.5123 Pfeifer A.M.A., Cole K.E., Smoot D.T., Weston A., Groopman J.D., Shields P.G., Vignaud J.M., Juillerat M., Lipsky M.M., Trump B.F., Lechner J.F., Harris C.C. Simian virus 40 large tumor antigen-immortalized normal human liver epithelial cells express hepatocyte characteristics and metabolize chemical carcinogens. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:5123-5127(1993)
PubMed=8504475; DOI=10.1093/carcin/14.5.833 Lehman T.A., Modali R., Boukamp P., Stanek J., Bennett W.P., Welsh J.A., Metcalf R.A., Stampfer M.R., Fusenig N.E., Rogan E.M., Harris C.C. p53 mutations in human immortalized epithelial cell lines. Carcinogenesis 14:833-839(1993)
Patent=US5759765 Harris C.C., Cole K.H., Lechner J.F., Reddel R.R. Human liver epithelial cell lines. Patent number US5759765, 02-Jun-1998
PubMed=23887712; DOI=10.1038/ncomms3218 Nault J.-C., Mallet M., Pilati C., Calderaro J., Bioulac-Sage P., Laurent C., Laurent A., Cherqui D., Balabaud C., Zucman-Rossi J. High frequency of telomerase reverse-transcriptase promoter somatic mutations in hepatocellular carcinoma and preneoplastic lesions. Nat. Commun. 4:2218-2218(2013) | ||
驗收細胞注意事項
1、收到人肝永生化細胞THLE-3細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。
2、收到人肝永生化細胞THLE-3細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人肝永生化細胞THLE-3細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養。若細胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到人肝永生化細胞THLE-3細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML 培養基繼續培養：超過 80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。
6、24 小時后，人肝永生化細胞THLE-3細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2 培養。
特別提醒： 原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。
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