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| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN60800646 |
|---|---|---|---|
| 規格 | T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
細胞名稱 | 人結腸癌細胞HT-29 |
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貨物編碼 | BFN60800646 | ||
產品規格 | T25培養瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 1類 | ||
培養體系 | DMEM高糖培養基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） | ||
培養溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人結腸癌細胞HT-29細胞是1964年由FoghJ用移植培養方法和含15%FBS的F12培養液從原發性腫瘤分離的。近來，已建株的培養細胞用含血清的McCoy's5a培養基培養。該細胞系在裸鼠中成瘤，也能在類固醇處理的地鼠中成瘤。該細胞可合成IgA、CEA、TGFβ結合蛋白和黏液素；表達尿激酶受體，但沒有檢測到血漿酶原活性；不表達CD4，但細胞表面表達半乳糖神經酰胺（HIV的可能替代受體）。該細胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽性；p53基因過表達。人結腸癌細胞HT-29細胞由青旗（上海）生物技術發展有限公司于2017年引種自ATCC(HTB-38)。 | ||
注釋 | Part of: AstraZeneca Colorectal cell line (AZCL) panel. Part of: Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) project. Part of: COSMIC cell lines project. Part of: JFCR39 cancer cell line panel. Part of: KuDOS 95 cell line panel. Part of: MD Anderson Cell Lines Project. Part of: NCI-60 cancer cell line panel. From: Memorial Sloan Kettering Cancer Center; New York; USA. Registration: Memorial Sloan Kettering Cancer Center Office of Technology Development; SK 809. Characteristics: Hypertriploid karyotype. Doubling time: 24 hours (PubMed=25984343); 24 hours (PubMed=23546019); 19.5 hours (NCI-DTP); ~24 hours (CLS); ~40-60 hours (DSMZ); ~23 hours (PBCF). Microsatellite instability: Stable (MSS) (PubMed=9000147; PubMed=24042735; PubMed=25926053; PubMed=28683746; Sanger). Omics: Array-based CGH. Omics: CNV analysis. Omics: Deep exome analysis. Omics: Deep phosphoproteome analysis. Omics: Deep proteome analysis. Omics: Deep quantitative phosphoproteome analysis. Omics: Deep quantitative proteome analysis. Omics: Deep RNAseq analysis. Omics: DNA methylation analysis. Omics: Fluorescence phenotype profiling. Omics: lncRNA expression profiling. Omics: Metabolome analysis. Omics: miRNA expression profiling. Omics: N-glycan profiling. Omics: Protein expression by reverse-phase protein arrays. Omics: shRNA library screening. Omics: SNP array analysis. Omics: Transcriptome analysis. Caution: Indicated in PubMed=11921276 as originating from an adenocarcinoma of the rectosigmoid part of the intestine, but is only indicated in the oldest publication (DOI=10.1007/978-1-4757-1647-4_5) as a colon adenocarcinoma. Misspelling: HCT29; In GEO GSM206503. | ||
STR信息 | Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：11，12；D16S539：11，12；D18S51：13；D19S433：14；D21S11：29，30；D2S1338：19，23；D3S1358：15，16.3；D5S818：11，12；D7S820：10；D8S1179：10，16；FGA：20，22；TH01：6，9；TPOX：8，9；vWA：17，19； | ||
參考文獻 | PubMed=27377824; DOI=10.1038/sdata.2016.52 Mestdagh P., Lefever S., Volders P.-J., Derveaux S., Hellemans J., Vandesompele J. Long non-coding RNA expression profiling in the NCI60 cancer cell line panel using high-throughput RT-qPCR. Sci. Data 3:160052-160052(2016)
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驗收細胞注意事項
1、收到人結腸癌細胞HT-29細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。
2、收到人結腸癌細胞HT-29細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人結腸癌細胞HT-29細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養。若細胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到人結腸癌細胞HT-29細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML 培養基繼續培養：超過 80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。
6、24 小時后，人結腸癌細胞HT-29細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2 培養。
特別提醒： 原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。
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