解析！動物elisa試劑盒的關鍵試驗步驟

　　在動物elisa試劑盒實驗的時候，我們經常會遇到樣品濃度接近試劑盒的靈敏度，容易發(fā)生樣本OD450值低于空白值的現象，特別是在血清和血漿樣本中。這就有可能是基質效應導致的結果。基質是指樣品中目標分析物以外的部分。由于基質成分會對分析過程有顯著干擾，影響分析結果的準確性。業(yè)內把這些影響統(tǒng)稱為基質效應。這是開發(fā)和使用中需要避開的雷。

 

　　下面咱們來說下動物elisa試劑盒的關鍵試驗步驟：

　　1、重要的洗刷：

　　如果洗刷不充分，會形成一系列的差異和高布景冬導致試驗成果偏差大。如果未結合的材料殘留在微孔板中，那么它會添加布景噪音。條件答應的情況下，恰當添加洗刷液中的鹽濃度，這會阻撓非特異結合反響。如果布景過高，置疑洗刷不行時，能夠測驗添加洗刷次數。

　　2、關鍵的關閉：

　　關閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的時機。如果布景過高，置疑關閉不充分，那么能夠測驗運用更高濃度的關閉液，或恰當延長關閉時刻現在主要有兩種類型的關閉液，蛋白和非離子型去污劑。運用的類型須取決于多個要素，包含微孔板的外表試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的關閉液應降低非特異性結合，但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。

　　3、抗體濃度須優(yōu)化：

　　如果試劑稍有不同，則可能需求優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結合會添加布景。為了防止這一點，切勿運用過多的一抗或二抗。

　　4、檢測試劑要適量：

　　必定不能夠運用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或許未正確稀釋，則會導致高布景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時應加入停止液。