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    TG1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

    TG1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

    簡(jiǎn)要描述:TG1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
    TG1來(lái)源于E. coli K-12菌株,是目前生長(zhǎng)速度極快的克隆用大腸桿菌菌株,在平板上37℃,7 h可見(jiàn)克隆。主要的噬菌體展示用菌株,同時(shí)也可用于普通質(zhì)粒的構(gòu)建,lacIqZΔM15的存在使其可以用于藍(lán)白斑篩選等實(shí)驗(yàn);但不含核酸酶endA1突變,體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時(shí)推薦使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液以去除菌體內(nèi)大量的核酸酶。

    更新時(shí)間:2022-01-18

    廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

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    詳情介紹
    品牌其他品牌貨號(hào)BFNC86015
    規(guī)格10x100ul/50x100ul供貨周期現(xiàn)貨
    主要用途僅用于科研應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

    TG1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞



    產(chǎn)品規(guī)格CAT#: BFNC86015-01(10×100ul)/BFNC86015-02(50×100ul)


    TG1:                                                         100μl/支

    pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

    保存條件(保質(zhì)期):                            -80℃(6個(gè)月)




    基因型

    [F′traD36 proAB lacIqM15] supE thi-1Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rKmK)


    產(chǎn)品說(shuō)明

    TG1來(lái)源于E. coli K-12菌株,是目前生長(zhǎng)速度極快的克隆用大腸桿菌菌株,在平板上37℃,7 h可見(jiàn)克隆。主要的噬菌體展示用菌株,同時(shí)也可用于普通質(zhì)粒的構(gòu)建,lacIqZΔM15的存在使其可以用于藍(lán)白斑篩選等實(shí)驗(yàn);但不含核酸酶endA1突變,體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時(shí)推薦使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液以去除菌體內(nèi)大量的核酸酶。

    青旗生物生產(chǎn)的TG1感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>109cfu/μg DNA。


    操作方法


    1. TG1感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手bo打EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

    2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

    3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YTLB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

    4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YTLB培養(yǎng)基上。

    5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。


    TG1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞


    注意事項(xiàng)

    1. 感受態(tài)細(xì)胞適宜在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

    2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。

    3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。




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