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    NovaBlue(DE3)感受態細胞

    NovaBlue(DE3)感受態細胞

    簡要描述:NovaBlue(DE3)感受態細胞
    NovaBlue(DE3)來源于K12菌株,具有*的轉化效率,是轉化效率較高的原核表達菌株,可同時用于普通質粒的構建和蛋白的原核表達。NovaBlue(DE3)菌株染色體DNA中整合了λ噬菌體DE3區,使得NovaBlue(DE3)菌株可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,廣泛用于pET系列,pGEX,pMAL等質粒的蛋白表達。

    更新時間:2022-01-20

    廠商性質:生產廠家

    瀏覽次數:1015

    詳情介紹
    品牌其他品牌貨號BFNC86087
    規格10x100ul/50x100ul供貨周期現貨
    主要用途僅用于科研應用領域醫療衛生,生物產業

    NovaBlue(DE3)感受態細胞



    產品規格CAT#: BFNC86087-01(10×100ul)/BFNC86087-02(50×100ul)


    NovaBlue(DE3):                                        100μl/支

    pUC19 (control vector,10pg/μl):                    10μl

    保存條件(保質期):                             -80℃(6個月)



    基因型

    F`[ proA+B+ lacIq ZΔM15::Tn10 (TetR)] endA1 hsdR17(rk12-,mk12+) supE44 thi -1 recA1 gyrA96 relA1 lac(DE3)






    產品說明


    NovaBlue(DE3)來源于K12菌株,具有*的轉化效率,是轉化效率較高的原核表達菌株,可同時用于普通質粒的構建和蛋白的原核表達。NovaBlue(DE3)菌株染色體DNA中整合了λ噬菌體DE3區,使得NovaBlue(DE3)菌株可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,廣泛用于pET系列,pGEX,pMAL等質粒的蛋白表達。NovaBlue(DE3)菌株具有四環素抗性,endA1和recA1的突變有利于插入DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取;lacZΔM15的存在使NovaBlue(DE3)可用于藍、白斑篩選。

    青旗生物生產的NovaBlue(DE3)感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19質粒檢測轉化效率達109cfu/μg DNA。




    操作方法

    1. NovaBlue(DE3)感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手bo打EP管底混勻,冰中靜置25分鐘。

    2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

    3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。

    4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的LB培養基上(若質粒濃度較高,也可稀釋后涂板,務必保證能在平板上挑到單克隆菌落)。

    5. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。






    NovaBlue(DE3)感受態細胞


    IPTG配制:

    Prepare a 1 M solution of IPTG (Isopropyl-β-D-thiogalactoside; Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside)

    by dissolving 2.38 g of IPTG in dd water and adjust the final volume to 10 ml. Filter sterilize before use.




    注意事項

    1. 感受態細胞盡量在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。

    2. 轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。

    3. 為獲得需要量的蛋白,誘導時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優化。




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