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    OrigamiB(DE3)感受態細胞

    OrigamiB(DE3)感受態細胞

    簡要描述:OrigamiB(DE3)感受態細胞
    OrigamiB(DE3)菌株包含突變的硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin reductase)(trxB) 和谷胱甘肽還原酶(glutathione reductase)(gor)基因,表達主要還原途徑的兩個關鍵酶。有利于形成正確折疊的含有二硫鍵的蛋白,增強蛋白的可溶性。

    更新時間:2022-01-20

    廠商性質:生產廠家

    瀏覽次數:731

    詳情介紹
    品牌其他品牌貨號BFNC86078
    規格10x100ul/50x100ul供貨周期現貨
    主要用途僅用于科研應用領域醫療衛生,生物產業

    OrigamiB(DE3)感受態細胞



    產品規格CAT#: BFNC86078-01(10×100ul)/BFNC86078-02(50×100ul)


    OrigamiB(DE3):                                        100μl/支

    pUC19 (control vector,10pg/μl):                    10μl

    保存條件(保質期):                             -80℃(6個月)



    基因型

    F-ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR)



    產品說明

    OrigamiB(DE3)菌株包含突變的硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin reductase)(trxB) 和谷胱甘肽還原酶(glutathione reductase)(gor)基因,表達主要還原途徑的兩個關鍵酶。有利于形成正確折疊的含有二硫鍵的蛋白,增強蛋白的可溶性。 該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(DE3區含有T7噬菌體RNA聚合酶),可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等質粒的蛋白表達,具有卡那霉素和四環素抗性,不能用于具有卡那霉素抗性質粒的表達。

    青旗生物生產的OrigamiB (DE3) 感受態細胞由特殊工藝制作,pUC19質粒檢測轉化效率達108 cfu/μg DNA。


    操作方法

    1. Origami B (DE3)感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手bo打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

    2. 42水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

    3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基(2YTLB),混勻后37200rpm復蘇60分鐘。

    4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YTLB培養基上。

    5. 將平板倒置放于37培養箱過夜培養。


    OrigamiB(DE3)感受態細胞


    IPTG


    Prepare a 1 M solution of IPTG (Isopropyl-β-D-thiogalactoside; Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside) bydissolving 2.38 g of IPTG in dd water and adjust the final volume to 10 ml. Filter sterilize before use.  


    注意事項

    1. 感受態細胞盡量在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。

    2. 混入質粒時應輕柔操作。

    3. 轉化高濃度的質??上鄳獪p少終用于涂板的菌量。

    4. 誘導時,IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)。

    5. 為獲得需要量的蛋白,誘導時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優化。Origami B(DE3) Chemically Competent Cell 產品說明書

    6. 具有卡那霉素抗性,不能用于具有卡那霉素抗性質粒的表達.




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